Techniques Biotechnologiques
1
PCR (Polymerase Chain Reaction)
2
Électrophorèse sur gel
3
Séquençage de l'ADN
4
Clonage moléculaire
Nombre de copies = 2ⁿ (après n cycles de PCR)
Exemple: 30 cycles → 1 milliard de copies
Applications :
• Diagnostic médical
• Identification génétique
• Recherche scientifique
• Agriculture transgénique
• Identification génétique
• Recherche scientifique
• Agriculture transgénique
Exemple PCR :
Amplification d'un gène spécifique
pour analyse ou clonage
pour analyse ou clonage
Génie Génétique
ADN recombinant
Vecteurs (plasmides, virus)
Enzymes de restriction
ADN ligase
Processus de Clonage
Coupe du gène cible
Insertion dans vecteur
Transformation bactérienne
Sélection des clones
Conseils & Astuces
PCR amplifie spécifiquement une séquence cible
L'électrophorèse sépare l'ADN selon sa taille
Les enzymes de restriction reconnaissent des séquences spécifiques
Un vecteur doit être capable de répliquer dans la cellule hôte
Retenir les étapes du clonage : coupe-insertion-transformation-sélection
Erreurs Fréquentes
Erreur 1 :
Confondre ADN recombinant et ADN naturel
Erreur 2 :
Croire que la PCR peut amplifier n'importe quelle séquence sans amorces
Erreur 3 :
Oublier que le clonage nécessite une étape de sélection